儀器科普丨Master-9脈沖刺激器超實(shí)用使用技巧
Master-9是電生理實(shí)驗(yàn)中常用的電刺激儀器,下面分享一個(gè)LTP誘發(fā)實(shí)驗(yàn)刺激參數(shù)常用設(shè)置。
長時(shí)程增強(qiáng)(Long-term potentiation, LTP)是神經(jīng)元突觸可塑性的重要表現(xiàn)。當(dāng)在突觸前給予一串或幾串高頻刺激后,隨后的單個(gè)刺激引起的突觸后誘發(fā)電位的幅度將顯著增大,誘發(fā)電位的潛伏期縮短,這種現(xiàn)象可持續(xù)很長時(shí)間,在活體動(dòng)物可持續(xù)幾天到幾個(gè)星期,在離體標(biāo)本可持續(xù)幾個(gè)小時(shí),這就是LTP現(xiàn)象。
LTP 的記錄一般是先記錄一段(如1 hr)基礎(chǔ)誘發(fā)電位(即用單個(gè)刺激誘發(fā)突觸后電位),接著給予高頻刺激(High frequency stimulation, HFS),一般是給予高頻率的串刺激來誘發(fā)LTP(可不做記錄),*后再記錄一段(如1 hr)基礎(chǔ)刺激誘發(fā)電位結(jié)束。觀察HFS前后的變化情況,借以研究突觸可塑性的變化及機(jī)制分析。
預(yù)刺激(尋找電位、調(diào)節(jié)電位幅度時(shí)用)
舉例:每5 sec給予1個(gè)刺激脈沖,脈沖寬度100μs。
參數(shù):Channel #1, Mode=FREE-RUN, Duration=100 μs, Interval=5 sec
圖2
設(shè)置:D1, 100, μs
I1, 5, sec
實(shí)施:按鍵“1”,即開始輸出刺激脈沖。
基礎(chǔ)刺激(高頻刺激前、后記錄用)
舉例:每 1 min 給予 1 個(gè)刺激脈沖,脈沖寬度 100 μs,連續(xù)刺激 1 hr。
參數(shù):Channel #2, Mode=TRAIN, N=60, Delay=20 ms, Duration=100 μs, Interval=60 sec
圖3
設(shè)置:
M2, TRAIN
N2, 60, ENTER
L2, 20, msec
D2, 100, μs
I2, 60, sec
實(shí)施:按鍵“2”。
圖4
a)例1:
1 sec 內(nèi)給予 100 個(gè)刺激脈沖,脈沖寬度 100 μs。
參數(shù):Channel #3, Mode=TRAIN, N=100, Delay=20 ms, Duration=100 μs, Interval=10 ms
圖5
設(shè)置:
M3, TRAIN
N3, 100, ENTER
L3, 20, msec
D3, 100, μs
I3, 10,msec
實(shí)施:按鍵“3”輸出刺激脈沖。
b) 例2:
串內(nèi)(Train內(nèi))頻率80Hz,共給予5個(gè)刺激脈沖(記為1個(gè)Train);串間(Train間)頻率5 Hz,共給予10個(gè)Train。脈沖寬度80 μs。
圖6
分析:串內(nèi)頻率80 Hz,則Interval=12.5 ms;串間頻率5 Hz,則Interval=200 ms。因刺激脈沖有兩種輸出頻率,單獨(dú)用1個(gè)channel無法輸出。 需要用2個(gè)channel。 1個(gè)用于觸發(fā),觸發(fā)脈沖設(shè)為10,Interval=200ms。1個(gè)用于輸出刺激脈沖,數(shù)目為5,Interval=12.5 ms。
參數(shù):
(1)Channel #4, Mode=TRAIN, N=10, Delay=20 ms, Duration=80 μs, Interval=200 ms
(2)Channel #3, Mode=TRAIN, N=5, Duration=80 μs, Interval=12.5 ms
圖7-8
設(shè)置:
(1)
M4, TRAIN
N 4, 10, ENTER
L4, 20, msec
D4, 80, μs
I4, 200, msec
(2)
M3, TRAIN
N3, 5, ENTER
D3, 80, μs
I3, 10, msec
(3)
點(diǎn)擊channel #4(左側(cè))和channel #3(*上一行)相交格。
設(shè)置說明:設(shè)置channel #4用來觸發(fā)channel #3;為了觸發(fā)channel #3輸出10個(gè)Train,我們?cè)O(shè)置channel #4輸出10個(gè)相應(yīng)的觸發(fā)脈沖。
實(shí)施:按鍵“4”觸發(fā)channel #3的刺激輸出。
圖9
連線說明:為了在連線上方便,可以將channel #2和channel #3通過OUT A輸出給隔離器。即在連接表上(圖9),分別點(diǎn)擊channel #2(左側(cè))、channel #3(左側(cè))和OUT A(*上一行)的相交格。當(dāng)要輸出channel #2(基礎(chǔ)刺激)時(shí),按鍵“2”輸出60個(gè)刺激脈沖后會(huì)自動(dòng)停止。然后按鍵“4”,channel #4觸發(fā)輸出channel #3的高頻刺激脈沖。
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